Mitochondrial DNA diversity and maternal origins of Pakistani donkey / Diversidade de DNA mitocondrial e origens maternas do burro do Paquistão

Domestic donkey plays a key role as a draft animal in rural economy of Pakistan where its population is increasing every year. The complete mtDNA control region of forty randomly sampled donkeys was PCR- amplified and sequenced bi-directionally using specific primers. Distinct mtDNA haplotypes obtained in the current study (KY446001−KY446011) were subjected to haplotype (h) and nucleotide diversity (π) measures using DnaS as well as to phylogenetic, Network, and AMOVA analyses. There were a total 27 polymorphic sites present within 11 unique mtDNA haplotypes from the studied 40 animals from different regions. Neighbor-joining network and median-joining network both illustrated the splitting of all these haplotypes into two well-defined Nubian and Somali lineages, confirming African maternal origin of Pakistani domestic donkey. Diversity parameters h (0.967± 0.037) and π (0.02917± 0.00307) were found to reveal high levels of genetic diversity in Pakistani donkeys. AMOVA demonstrated only 1% of genetic differences between two mtDNA maternal lineages, pointing to lack of population substructure in Pakistani donkeys as is the case with worldwide domestic donkey population. Pakistani donkeys have African maternal origin and high levels of mtDNA diversity. High genetic diversity may be due to non-selective breeding and heteroplasmy. We herein provide the first report on mtDNA diversity of control region in Pakistani domestic donkey.

O burro doméstico possui um papel fundamental como animal de tração na economia rural do Paquistão, onde a população desse animal está aumentando a cada ano. A região de controle de mtDNA completa de 40 burros amostrados aleatoriamente foi ampliada por PCR e sequenciada bidirecionalmente por intermédio de primers específicos. Haplótipos distintos de mtDNA obtidos no estudo atual (KY446001 − KY446011) foram submetidos a medidas de haplótipo (h) e diversidade de nucleotídeos (π) por meio de DnaS, bem como análises filogenéticas, de rede e AMOVA. Havia um total de 27 sítios polimórficos presentes em 11 haplótipos de mtDNA exclusivos dos 40 animais estudados de diferentes regiões. A rede de união de vizinhos e a rede de união mediana ilustram a divisão de todos esses haplótipos em duas linhagens núbias e somalis bem definidas, confirmando a origem materna africana do burro doméstico do Paquistão. Os parâmetros de diversidade h (0,967 ± 0,037) e π (0,02917 ± 0,00307) revelaram altos níveis de diversidade genética em burros paquistaneses. AMOVA demonstrou apenas 1% de diferenças genéticas entre as duas linhagens maternas de mtDNA, apontando a falta de subestrutura populacional em burros paquistaneses, como é o caso da população mundial de burros domésticos. Os burros paquistaneses têm origem materna africana e altos níveis de diversidade de mtDNA. A alta diversidade genética pode ser por causa da reprodução não seletiva e de heteroplasmia. Aqui, fornecemos o primeiro relatório sobre a diversidade do mtDNA da região de controle em burros domésticos do Paquistão

Mitochondrial DNA diversity and maternal origins of Pakistani donkey

Abstract Domestic donkey plays a key role as a draft animal in rural economy of Pakistan where its population is increasing every year. The complete mtDNA control region of forty randomly sampled donkeys was PCR- amplified and sequenced bi-directionally using specific primers. Distinct mtDNA haplotypes obtained in the current study (KY446001KY446011) were subjected to haplotype (h) and nucleotide diversity () measures using DnaS as well as to phylogenetic, Network, and AMOVA analyses. There were a total 27 polymorphic sites present within 11 unique mtDNA haplotypes from the studied 40 animals from different regions. Neighbor-joining network and median-joining network both illustrated the splitting of all these haplotypes into two well-defined Nubian and Somali lineages, confirming African maternal origin of Pakistani domestic donkey. Diversity parameters h (0.967± 0.037) and (0.02917± 0.00307) were found to reveal high levels of genetic diversity in Pakistani donkeys. AMOVA demonstrated only 1% of genetic differences between two mtDNA maternal lineages, pointing to lack of population substructure in Pakistani donkeys as is the case with worldwide domestic donkey population. Pakistani donkeys have African maternal origin and high levels of mtDNA diversity. High genetic diversity may be due to non-selective breeding and heteroplasmy. We herein provide the first report on mtDNA diversity of control region in Pakistani domestic donkey.

Resumo O burro doméstico possui um papel fundamental como animal de tração na economia rural do Paquistão, onde a população desse animal está aumentando a cada ano. A região de controle de mtDNA completa de 40 burros amostrados aleatoriamente foi ampliada por PCR e sequenciada bidirecionalmente por intermédio de primers específicos. Haplótipos distintos de mtDNA obtidos no estudo atual (KY446001 KY446011) foram submetidos a medidas de haplótipo (h) e diversidade de nucleotídeos () por meio de DnaS, bem como análises filogenéticas, de rede e AMOVA. Havia um total de 27 sítios polimórficos presentes em 11 haplótipos de mtDNA exclusivos dos 40 animais estudados de diferentes regiões. A rede de união de vizinhos e a rede de união mediana ilustram a divisão de todos esses haplótipos em duas linhagens núbias e somalis bem definidas, confirmando a origem materna africana do burro doméstico do Paquistão. Os parâmetros de diversidade h (0,967 ± 0,037) e (0,02917 ± 0,00307) revelaram altos níveis de diversidade genética em burros paquistaneses. AMOVA demonstrou apenas 1% de diferenças genéticas entre as duas linhagens maternas de mtDNA, apontando a falta de subestrutura populacional em burros paquistaneses, como é o caso da população mundial de burros domésticos. Os burros paquistaneses têm origem materna africana e altos níveis de diversidade de mtDNA. A alta diversidade genética pode ser por causa da reprodução não seletiva e de heteroplasmia. Aqui, fornecemos o primeiro relatório sobre a diversidade do mtDNA da região de controle em burros domésticos do Paquistão.

Honey as a bioindicator of environmental organochlorine insecticides contamination / Mel como bioindicador de contaminação ambiental de inseticidas organoclorados

Abstract Honey is a suitable matrix for the evaluation of environmental contaminants including organochlorine insecticides. The present study was conducted to evaluate residues of fifteen organochlorine insecticides in honey samples of unifloral and multifloral origins from Dir, Pakistan. Honey samples (5 g each) were extracted with GC grade organic solvents and then subjected to Rotary Evaporator till dryness. The extracts were then mixed with n-Hexane (5 ml) and purified through Column Chromatography. Purified extracts (1μl each) were processed through Gas Chromatograph coupled with Electron Capture Detector (GC-ECD) for identification and quantification of the insecticides. Of the 15 insecticides tested, 46.7% were detected while 53.3% were not detected in the honey samples. Heptachlor was the most prevalent insecticide with a mean level of 0.0018 mg/kg detected in 80% of the samples followed by β-HCH with a mean level of 0.0016 mg/kg detected in 71.4% of the honey samples. Honey samples from Acacia modesta Wall. were 100% positive for Heptachlor with a mean level of 0.0048 mg/kg followed by β-HCH with a mean level of 0.003 mg/kg and frequency of 83.3%. Minimum levels of the tested insecticides were detected in the unifloral honey from Ziziphus jujuba Mill. Methoxychlor, Endosulfan, Endrin and metabolites of DDT were not detected in the studied honey samples. Some of the tested insecticides are banned in Pakistan but are still detected in honey samples indicating their use in the study area. The detected levels of all insecticides were below the Maximum Residue Levels (MRLs) and safe for consumers. However, the levels detected can cause mortality in insect fauna. The use of banned insecticides is one of the main factors responsible for the declining populations of important insect pollinators including honeybees.

Resumo O mel é uma matriz adequada para a avaliação de contaminantes ambientais, incluindo inseticidas organoclorados. O presente estudo foi conduzido para avaliar resíduos de 15 inseticidas organoclorados em amostras de mel de origem unifloral e multifloral de Dir, Paquistão. Amostras de mel (5 g cada) foram extraídas com solventes orgânicos de grau GC e, em seguida, submetidas ao evaporador rotativo até a secura. Os extratos foram então misturados com n-hexano (5 ml) e purificados por cromatografia em coluna. Os extratos purificados (1μl cada) foram processados através de cromatógrafo gasoso acoplado a detector de captura de elétrons (GC-ECD) para identificação e quantificação dos inseticidas. Dos 15 inseticidas testados, 46,7% foram detectados enquanto 53,3% não foram detectados nas amostras de mel. O heptacloro foi o inseticida mais prevalente com um nível médio de 0,0018 mg / kg detectado em 80% das amostras, seguido por β-HCH com um nível médio de 0,0016 mg / kg detectado em 71,4% das amostras de mel. Amostras de mel da parede de Acacia modesta foram 100% positivos para heptacloro com um nível médio de 0,0048 mg / kg seguido por β-HCH com um nível médio de 0,003 mg / kg e frequência de 83,3%. Níveis mínimos dos inseticidas testados foram detectados no mel unifloral de Ziziphus jujuba da usina. Metoxicloro, Endosulfan, Endrin e metabólitos do DDT não foram detectados nas amostras de mel estudadas. Alguns dos inseticidas testados são proibidos no Paquistão, mas ainda são detectados em amostras de mel, indicando seu uso na área de estudo. Os níveis detectados de todos os inseticidas estavam abaixo dos Níveis Máximos de Resíduos (MRLs) e seguros para os consumidores. No entanto, os níveis detectados podem causar mortalidade na fauna de insetos. O uso de inseticidas proibidos é um dos principais fatores responsáveis pelo declínio das populações de importantes insetos polinizadores, incluindo as abelhas.

Diversity of the Anisoptera & Zygoptera (Odonata: Insecta) of Swat, Pakistan / Diversidade de Anisoptera e Zygoptera (Odonata: Insecta) de Swat, Paquistão

Abstract Odonates are important biological control agents for the control of insect pests and insect disease vectors of medical and veterinary importance. The present study was conducted to evaluate the odonate fauna of Swat, Pakistan from March to October 2019. A total of 200 specimens of odonates were collected from diverse habitats. The collected specimens of the order Odonata belonged to 5 families, three families of suborder Anisoptera namely Libellulidae, Gomphidae and Aeshnidae while two families of suborder Zygoptera (Chlorocyphidae and Coenagrionidae). The specimens were categorized into 12 genera and 22 species. Libellulidae was the dominant family (n = 138) accounting for 69% of the odonate fauna. Orthetrum was the dominant genus (n = 73) of suborder Anisoptera accounting for 36.5% of the odonate fauna. The least dominant genera were Anax, Paragomphus and Rhyothemis (n = 5 each) accounting each for 2.5% of the odonate fauna. In Zygoptera, the dominant genus was Ceriagrion (12.5%) and the least dominant genus was Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) was the most abundant odonate species in the study area recorded from all surveyed habitats. Shannon Diversity Index (H) was 2.988 and Simpson Diversity Index (D) was 0.95 for the collected odonate fauna. The highest abundance of Odonata was recorded in August, September and May while no odonate species were recorded in January, February, November and December. Lotic water bodies were the most suitable habitats with abundant odonate fauna. Anax immaculifrons (Rambur, 1842) was the largest sized odonate species having a wingspan of 53.2±1.63 mm and body length of 56.3 ± 0.4 mm. The present study shows the status of odonate fauna of Swat, Pakistan in diverse habitats and seasonsonal variation throughout the year. Further work is recommended to bridge the gaps in the existing literature.

Resumo Odonatos são importantes agentes de controle biológico para o controle de insetos-praga e vetores de doenças de insetos de importância médica e veterinária. O presente estudo foi conduzido para avaliar a fauna de odonatos de Swat, Paquistão, de março a outubro de 2019. Um total de 200 espécimes de odonatos foi coletado em diversos habitats. Os espécimes coletados da ordem Odonata pertenciam a cinco famílias, três famílias da subordem Anisoptera, a saber, Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae, enquanto duas famílias eram da subordem Zygoptera (Chlorocyphidae e Coenagrionidae). Os espécimes foram classificados em 12 gêneros e 22 espécies. Libellulidae foi a família dominante (n = 138), respondendo por 69% da fauna de odonatos. Orthetrum foi o gênero dominante (n = 73) da subordem Anisoptera, responsável por 36,5% da fauna de odonatos. Os gêneros menos dominantes foram Anax, Paragomphus e Rhyothemis (n = 5 cada), representando cada um 2,5% da fauna de odonatos. Em Zygoptera, o gênero dominante foi Ceriagrion (12,5%), e o gênero menos dominante foi Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) foi a espécie de odonato mais abundante na área de estudo, registrada em todos os habitats pesquisados. O Índice de Diversidade de Shannon (H) foi de 2,988, e o Índice de Diversidade de Simpson (D) foi de 0,95 para a fauna de odonatos coletados. A maior abundância de Odonata foi registrada em agosto, setembro e maio, enquanto nenhuma espécie de Odonata foi registrada em janeiro, fevereiro, novembro e dezembro. Corpos d'água lóticos foram os habitats mais adequados, com abundante fauna de odonatos. Anax imaculifrons (Rambur, 1842) foi a espécie de odonato de maior tamanho, com envergadura de 53,2 ± 1,63 mm e comprimento do corpo de 56,3 ± 0,4 mm. O presente estudo mostrou o status da fauna de odonatos de Swat, Paquistão, em diversos habitats e variação sazonal ao longo do ano. Recomenda-se trabalho adicional para preencher as lacunas na literatura existente.

Diversity, distribution and relative abundance of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan / Diversidade, distribuição e abundância relativa da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão

Abstract The present study was conducted to evaluate the diversity, distribution (C) and relative abundance (RA) of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan. Collection of specimens (n = 1087) was made during September 2018 to July 2019 at six different habitats including freshwater bodies, rice fields, animal sheds, indoors, drains and sewage waters. Specimens were collected through light traps, pyrethrum spray, aspirators and nets and subsequently killed, preserved and then arranged in entomological boxes for identification. Three genera were identified namely Culex, Anopheles and Aedes. A total of fourteen species were identified namely: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762) An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) and An. annularis (van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus was found constantly distributed in the study area with RA = 16.5% and C = 100%. An. annularis was found as a satellite species, sporadically distributed in the study area having RA = 0.9% and C = 17%. Diversity indices of mosquitoes in the studied habitats were found as, Shannon-Wiener Index (2.415), Simpson Index (9.919), Fisher's Index (2.269) and Margalef's Index (1.859). A statistically significant difference was recorded in mosquito diversity in the six habitats (Kruskal-Wallis, chi-squared, H = 17.5, df = 5, P = 0.003 at α = 0.05). The present study encompasses mosquito fauna of Malakand, Pakistan with respect to diversity, relative abundance and distribution in diverse habitats and all seasons of the year. This will assist scientists working in various fields related with epidemiology, medical and veterinary entomology, ecology and allied areas of biological sciences.

Resumo O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade, distribuição (C) e abundância relativa (RA) da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão. A coleta de espécimes (n = 1087) foi feita durante o período de setembro de 2018 a julho de 2019 em seis habitats diferentes, incluindo corpos d'água, campos de arroz, galpões de animais, ambientes internos, ralos e águas residuais. Os espécimes foram coletados por meio de armadilhas luminosas, spray de piretro, aspiradores e redes e posteriormente mortos, preservados e depois dispostos em caixas entomológicas para identificação. Três gêneros foram identificados, nomeadamente Culex, Anopheles e Aedes. Um total de 14 espécies foi identificado, a saber: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762), An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) e An. annularis (Van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus foi encontrado constantemente distribuído na área de estudo com AR = 16,5% e C = 100%. A. annularis foi encontrada como espécie satélite, distribuída esporadicamente na área de estudo com RA = 0,9% e C = 17%. Os índices de diversidade de mosquitos nos habitats estudados foram encontrados como índice de Shannon-Wiener (2,415), índice de Simpson (9,919), índice de Fisher (2,269) e índice de Margalef (1,859). Uma diferença estatisticamente significativa foi registrada na diversidade de mosquitos nos seis habitats (Kruskal-Wallis, qui-quadrado, H = 17,5, df = 5, P = 0,003 em α = 0,05). O presente estudo abrange a fauna de mosquitos de Malakand, Paquistão, com respeito à diversidade, abundância relativa e distribuição em diversos habitats e em todas as estações do ano. Isso ajudará os cientistas que trabalham em vários campos relacionados com a epidemiologia, entomologia médica e veterinária, ecologia e áreas afins das ciências biológicas.

Diversity, distribution and relative abundance of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan / Diversidade, distribuição e abundância relativa da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão

The present study was conducted to evaluate the diversity, distribution (C) and relative abundance (RA) of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan. Collection of specimens (n = 1087) was made during September 2018 to July 2019 at six different habitats including freshwater bodies, rice fields, animal sheds, indoors, drains and sewage waters. Specimens were collected through light traps, pyrethrum spray, aspirators and nets and subsequently killed, preserved and then arranged in entomological boxes for identification. Three genera were identified namely Culex, Anopheles and Aedes. A total of fourteen species were identified namely: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762) An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) and An. annularis (van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus was found constantly distributed in the study area with RA = 16.5% and C = 100%. An. annularis was found as a satellite species, sporadically distributed in the study area having RA = 0.9% and C = 17%. Diversity indices of mosquitoes in the studied habitats were found as, Shannon-Wiener Index (2.415), Simpson Index (9.919), Fisher's Index (2.269) and Margalef's Index (1.859). A statistically significant difference was recorded in mosquito diversity in the six habitats (Kruskal-Wallis, chi-squared, H = 17.5, df = 5, P = 0.003 at α = 0.05). The present study encompasses [...].

O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade, distribuição (C) e abundância relativa (RA) da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão. A coleta de espécimes (n = 1087) foi feita durante o período de setembro de 2018 a julho de 2019 em seis habitats diferentes, incluindo corpos d’água, campos de arroz, galpões de animais, ambientes internos, ralos e águas residuais. Os espécimes foram coletados por meio de armadilhas luminosas, spray de piretro, aspiradores e redes e posteriormente mortos, preservados e depois dispostos em caixas entomológicas para identificação. Três gêneros foram identificados, nomeadamente Culex, Anopheles e Aedes. Um total de 14 espécies foi identificado, a saber: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762), An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) e An. annularis (Van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus foi encontrado constantemente distribuído na área de estudo com AR = 16,5% e C = 100%. A. annularis foi encontrada como espécie satélite, distribuída esporadicamente na área de estudo com RA = 0,9% e C = 17%. Os índices de diversidade de mosquitos nos habitats estudados foram encontrados como índice de Shannon-Wiener (2,415), índice de Simpson (9,919), índice de Fisher (2,269) e índice de Margalef (1,859). Uma diferença estatisticamente significativa foi registrada na diversidade de mosquitos nos seis habitats (Kruskal-Wallis, qui-quadrado, H = 17,5, df = 5, P = 0,003 em α = 0,05). O presente estudo abrange a fauna de mosquitos de Malakand, Paquistão, com respeito à diversidade, abundância relativa e distribuição em [...].

Honey as a bioindicator of environmental organochlorine insecticides contamination / Mel como bioindicador de contaminação ambiental de inseticidas organoclorados

Honey is a suitable matrix for the evaluation of environmental contaminants including organochlorine insecticides. The present study was conducted to evaluate residues of fifteen organochlorine insecticides in honey samples of unifloral and multifloral origins from Dir, Pakistan. Honey samples (5 g each) were extracted with GC grade organic solvents and then subjected to Rotary Evaporator till dryness. The extracts were then mixed with n-Hexane (5 ml) and purified through Column Chromatography. Purified extracts (1μl each) were processed through Gas Chromatograph coupled with Electron Capture Detector (GC-ECD) for identification and quantification of the insecticides. Of the 15 insecticides tested, 46.7% were detected while 53.3% were not detected in the honey samples. Heptachlor was the most prevalent insecticide with a mean level of 0.0018 mg/kg detected in 80% of the samples followed by β-HCH with a mean level of 0.0016 mg/kg detected in 71.4% of the honey samples. Honey samples from Acacia modesta Wall. were 100% positive for Heptachlor with a mean level of 0.0048 mg/kg followed by β-HCH with a mean level of 0.003 mg/kg and frequency of 83.3%. Minimum levels of the tested insecticides were detected in the unifloral honey from Ziziphus jujuba Mill. Methoxychlor, Endosulfan, Endrin and metabolites of DDT were not detected in the studied honey samples. Some of the tested insecticides are banned in Pakistan but are still detected in honey samples indicating their use in the study area. The detected levels of all insecticides were below the Maximum Residue Levels (MRLs) and safe for consumers. However, the levels detected can cause mortality in insect fauna. The use of banned insecticides is one of the main factors responsible for the declining populations of important insect pollinators including honeybees.

O mel é uma matriz adequada para a avaliação de contaminantes ambientais, incluindo inseticidas organoclorados. O presente estudo foi conduzido para avaliar resíduos de 15 inseticidas organoclorados em amostras de mel de origem unifloral e multifloral de Dir, Paquistão. Amostras de mel (5 g cada) foram extraídas com solventes orgânicos de grau GC e, em seguida, submetidas ao evaporador rotativo até a secura. Os extratos foram então misturados com n-hexano (5 ml) e purificados por cromatografia em coluna. Os extratos purificados (1μl cada) foram processados através de cromatógrafo gasoso acoplado a detector de captura de elétrons (GC-ECD) para identificação e quantificação dos inseticidas. Dos 15 inseticidas testados, 46,7% foram detectados enquanto 53,3% não foram detectados nas amostras de mel. O heptacloro foi o inseticida mais prevalente com um nível médio de 0,0018 mg / kg detectado em 80% das amostras, seguido por β-HCH com um nível médio de 0,0016 mg / kg detectado em 71,4% das amostras de mel. Amostras de mel da parede de Acacia modesta foram 100% positivos para heptacloro com um nível médio de 0,0048 mg / kg seguido por β-HCH com um nível médio de 0,003 mg / kg e frequência de 83,3%. Níveis mínimos dos inseticidas testados foram detectados no mel unifloral de Ziziphus jujuba da usina. Metoxicloro, Endosulfan, Endrin e metabólitos do DDT não foram detectados nas amostras de mel estudadas. Alguns dos inseticidas testados são proibidos no Paquistão, mas ainda são detectados em amostras de mel, indicando seu uso na área de estudo. Os níveis detectados de todos os inseticidas estavam abaixo dos Níveis Máximos de Resíduos (MRLs) e seguros para os consumidores. No entanto, os níveis detectados podem causar mortalidade na fauna de insetos. O uso de inseticidas proibidos é um dos principais fatores responsáveis pelo declínio das populações de importantes insetos polinizadores, incluindo as abelhas.

Diversity of the Anisoptera & Zygoptera (Odonata: Insecta) of Swat, Pakistan / Diversidade de Anisoptera e Zygoptera (Odonata: Insecta) de Swat, Paquistão

Odonates are important biological control agents for the control of insect pests and insect disease vectors of medical and veterinary importance. The present study was conducted to evaluate the odonate fauna of Swat, Pakistan from March to October 2019. A total of 200 specimens of odonates were collected from diverse habitats. The collected specimens of the order Odonata belonged to 5 families, three families of suborder Anisoptera namely Libellulidae, Gomphidae and Aeshnidae while two families of suborder Zygoptera (Chlorocyphidae and Coenagrionidae). The specimens were categorized into 12 genera and 22 species. Libellulidae was the dominant family (n = 138) accounting for 69% of the odonate fauna. Orthetrum was the dominant genus (n = 73) of suborder Anisoptera accounting for 36.5% of the odonate fauna. The least dominant genera were Anax, Paragomphus and Rhyothemis (n = 5 each) accounting each for 2.5% of the odonate fauna. In Zygoptera, the dominant genus was Ceriagrion (12.5%) and the least dominant genus was Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) was the most abundant odonate species in the study area recorded from all surveyed habitats. Shannon Diversity Index (H) was 2.988 and Simpson Diversity Index (D) was 0.95 for the collected odonate fauna. The highest abundance of Odonata was recorded in August, September and May while no odonate species were recorded in January, February, November and December. Lotic water bodies were the most suitable habitats with abundant odonate fauna. Anax immaculifrons (Rambur, 1842) was the largest sized odonate species having a wingspan of 53.2±1.63 mm and body length of 56.3 ± 0.4 mm. The present study shows the status of odonate fauna of Swat, Pakistan in diverse habitats and seasonsonal variation throughout the year. Further work is recommended to bridge the gaps in the existing literature.

Odonatos são importantes agentes de controle biológico para o controle de insetos-praga e vetores de doenças de insetos de importância médica e veterinária. O presente estudo foi conduzido para avaliar a fauna de odonatos de Swat, Paquistão, de março a outubro de 2019. Um total de 200 espécimes de odonatos foi coletado em diversos habitats. Os espécimes coletados da ordem Odonata pertenciam a cinco famílias, três famílias da subordem Anisoptera, a saber, Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae, enquanto duas famílias eram da subordem Zygoptera (Chlorocyphidae e Coenagrionidae). Os espécimes foram classificados em 12 gêneros e 22 espécies. Libellulidae foi a família dominante (n = 138), respondendo por 69% da fauna de odonatos. Orthetrum foi o gênero dominante (n = 73) da subordem Anisoptera, responsável por 36,5% da fauna de odonatos. Os gêneros menos dominantes foram Anax, Paragomphus e Rhyothemis (n = 5 cada), representando cada um 2,5% da fauna de odonatos. Em Zygoptera, o gênero dominante foi Ceriagrion (12,5%), e o gênero menos dominante foi Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) foi a espécie de odonato mais abundante na área de estudo, registrada em todos os habitats pesquisados. O Índice de Diversidade de Shannon (H) foi de 2,988, e o Índice de Diversidade de Simpson (D) foi de 0,95 para a fauna de odonatos coletados. A maior abundância de Odonata foi registrada em agosto, setembro e maio, enquanto nenhuma espécie de Odonata foi registrada em janeiro, fevereiro, novembro e dezembro. Corpos d’água lóticos foram os habitats mais adequados, com abundante fauna de odonatos. Anax imaculifrons (Rambur, 1842) foi a espécie de odonato de maior tamanho, com envergadura de 53,2 ± 1,63 mm e comprimento do corpo de 56,3 ± 0,4 mm. O presente estudo mostrou o status da fauna de odonatos de Swat, Paquistão, em diversos habitats e variação sazonal ao longo do ano. Recomenda-se trabalho adicional para preencher as lacunas na literatura existente.

Diversity, distribution and relative abundance of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan

Abstract The present study was conducted to evaluate the diversity, distribution (C) and relative abundance (RA) of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan. Collection of specimens (n = 1087) was made during September 2018 to July 2019 at six different habitats including freshwater bodies, rice fields, animal sheds, indoors, drains and sewage waters. Specimens were collected through light traps, pyrethrum spray, aspirators and nets and subsequently killed, preserved and then arranged in entomological boxes for identification. Three genera were identified namely Culex, Anopheles and Aedes. A total of fourteen species were identified namely: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762) An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) and An. annularis (van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus was found constantly distributed in the study area with RA = 16.5% and C = 100%. An. annularis was found as a satellite species, sporadically distributed in the study area having RA = 0.9% and C = 17%. Diversity indices of mosquitoes in the studied habitats were found as, Shannon-Wiener Index (2.415), Simpson Index (9.919), Fishers Index (2.269) and Margalefs Index (1.859). A statistically significant difference was recorded in mosquito diversity in the six habitats (Kruskal-Wallis, chi-squared, H = 17.5, df = 5, P = 0.003 at = 0.05). The present study encompasses mosquito fauna of Malakand, Pakistan with respect to diversity, relative abundance and distribution in diverse habitats and all seasons of the year. This will assist scientists working in various fields related with epidemiology, medical and veterinary entomology, ecology and allied areas of biological sciences.

Resumo O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade, distribuição (C) e abundância relativa (RA) da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão. A coleta de espécimes (n = 1087) foi feita durante o período de setembro de 2018 a julho de 2019 em seis habitats diferentes, incluindo corpos dágua, campos de arroz, galpões de animais, ambientes internos, ralos e águas residuais. Os espécimes foram coletados por meio de armadilhas luminosas, spray de piretro, aspiradores e redes e posteriormente mortos, preservados e depois dispostos em caixas entomológicas para identificação. Três gêneros foram identificados, nomeadamente Culex, Anopheles e Aedes. Um total de 14 espécies foi identificado, a saber: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762), An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) e An. annularis (Van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus foi encontrado constantemente distribuído na área de estudo com AR = 16,5% e C = 100%. A. annularis foi encontrada como espécie satélite, distribuída esporadicamente na área de estudo com RA = 0,9% e C = 17%. Os índices de diversidade de mosquitos nos habitats estudados foram encontrados como índice de Shannon-Wiener (2,415), índice de Simpson (9,919), índice de Fisher (2,269) e índice de Margalef (1,859). Uma diferença estatisticamente significativa foi registrada na diversidade de mosquitos nos seis habitats (Kruskal-Wallis, qui-quadrado, H = 17,5, df = 5, P = 0,003 em = 0,05). O presente estudo abrange a fauna de mosquitos de Malakand, Paquistão, com respeito à diversidade, abundância relativa e distribuição em diversos habitats e em todas as estações do ano. Isso ajudará os cientistas que trabalham em vários campos relacionados com a epidemiologia, entomologia médica e veterinária, ecologia e áreas afins das ciências biológicas.

Honey as a bioindicator of environmental organochlorine insecticides contamination

Abstract Honey is a suitable matrix for the evaluation of environmental contaminants including organochlorine insecticides. The present study was conducted to evaluate residues of fifteen organochlorine insecticides in honey samples of unifloral and multifloral origins from Dir, Pakistan. Honey samples (5 g each) were extracted with GC grade organic solvents and then subjected to Rotary Evaporator till dryness. The extracts were then mixed with n-Hexane (5 ml) and purified through Column Chromatography. Purified extracts (1l each) were processed through Gas Chromatograph coupled with Electron Capture Detector (GC-ECD) for identification and quantification of the insecticides. Of the 15 insecticides tested, 46.7% were detected while 53.3% were not detected in the honey samples. Heptachlor was the most prevalent insecticide with a mean level of 0.0018 mg/kg detected in 80% of the samples followed by -HCH with a mean level of 0.0016 mg/kg detected in 71.4% of the honey samples. Honey samples from Acacia modesta Wall. were 100% positive for Heptachlor with a mean level of 0.0048 mg/kg followed by -HCH with a mean level of 0.003 mg/kg and frequency of 83.3%. Minimum levels of the tested insecticides were detected in the unifloral honey from Ziziphus jujuba Mill. Methoxychlor, Endosulfan, Endrin and metabolites of DDT were not detected in the studied honey samples. Some of the tested insecticides are banned in Pakistan but are still detected in honey samples indicating their use in the study area. The detected levels of all insecticides were below the Maximum Residue Levels (MRLs) and safe for consumers. However, the levels detected can cause mortality in insect fauna. The use of banned insecticides is one of the main factors responsible for the declining populations of important insect pollinators including honeybees.

Resumo O mel é uma matriz adequada para a avaliação de contaminantes ambientais, incluindo inseticidas organoclorados. O presente estudo foi conduzido para avaliar resíduos de 15 inseticidas organoclorados em amostras de mel de origem unifloral e multifloral de Dir, Paquistão. Amostras de mel (5 g cada) foram extraídas com solventes orgânicos de grau GC e, em seguida, submetidas ao evaporador rotativo até a secura. Os extratos foram então misturados com n-hexano (5 ml) e purificados por cromatografia em coluna. Os extratos purificados (1l cada) foram processados através de cromatógrafo gasoso acoplado a detector de captura de elétrons (GC-ECD) para identificação e quantificação dos inseticidas. Dos 15 inseticidas testados, 46,7% foram detectados enquanto 53,3% não foram detectados nas amostras de mel. O heptacloro foi o inseticida mais prevalente com um nível médio de 0,0018 mg / kg detectado em 80% das amostras, seguido por -HCH com um nível médio de 0,0016 mg / kg detectado em 71,4% das amostras de mel. Amostras de mel da parede de Acacia modesta foram 100% positivos para heptacloro com um nível médio de 0,0048 mg / kg seguido por -HCH com um nível médio de 0,003 mg / kg e frequência de 83,3%. Níveis mínimos dos inseticidas testados foram detectados no mel unifloral de Ziziphus jujuba da usina. Metoxicloro, Endosulfan, Endrin e metabólitos do DDT não foram detectados nas amostras de mel estudadas. Alguns dos inseticidas testados são proibidos no Paquistão, mas ainda são detectados em amostras de mel, indicando seu uso na área de estudo. Os níveis detectados de todos os inseticidas estavam abaixo dos Níveis Máximos de Resíduos (MRLs) e seguros para os consumidores. No entanto, os níveis detectados podem causar mortalidade na fauna de insetos. O uso de inseticidas proibidos é um dos principais fatores responsáveis pelo declínio das populações de importantes insetos polinizadores, incluindo as abelhas.

Diversity of the Anisoptera & Zygoptera (Odonata: Insecta) of Swat, Pakistan

Abstract Odonates are important biological control agents for the control of insect pests and insect disease vectors of medical and veterinary importance. The present study was conducted to evaluate the odonate fauna of Swat, Pakistan from March to October 2019. A total of 200 specimens of odonates were collected from diverse habitats. The collected specimens of the order Odonata belonged to 5 families, three families of suborder Anisoptera namely Libellulidae, Gomphidae and Aeshnidae while two families of suborder Zygoptera (Chlorocyphidae and Coenagrionidae). The specimens were categorized into 12 genera and 22 species. Libellulidae was the dominant family (n = 138) accounting for 69% of the odonate fauna. Orthetrum was the dominant genus (n = 73) of suborder Anisoptera accounting for 36.5% of the odonate fauna. The least dominant genera were Anax, Paragomphus and Rhyothemis (n = 5 each) accounting each for 2.5% of the odonate fauna. In Zygoptera, the dominant genus was Ceriagrion (12.5%) and the least dominant genus was Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) was the most abundant odonate species in the study area recorded from all surveyed habitats. Shannon Diversity Index (H) was 2.988 and Simpson Diversity Index (D) was 0.95 for the collected odonate fauna. The highest abundance of Odonata was recorded in August, September and May while no odonate species were recorded in January, February, November and December. Lotic water bodies were the most suitable habitats with abundant odonate fauna. Anax immaculifrons (Rambur, 1842) was the largest sized odonate species having a wingspan of 53.2±1.63 mm and body length of 56.3 ± 0.4 mm. The present study shows the status of odonate fauna of Swat, Pakistan in diverse habitats and seasonsonal variation throughout the year. Further work is recommended to bridge the gaps in the existing literature.

Resumo Odonatos são importantes agentes de controle biológico para o controle de insetos-praga e vetores de doenças de insetos de importância médica e veterinária. O presente estudo foi conduzido para avaliar a fauna de odonatos de Swat, Paquistão, de março a outubro de 2019. Um total de 200 espécimes de odonatos foi coletado em diversos habitats. Os espécimes coletados da ordem Odonata pertenciam a cinco famílias, três famílias da subordem Anisoptera, a saber, Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae, enquanto duas famílias eram da subordem Zygoptera (Chlorocyphidae e Coenagrionidae). Os espécimes foram classificados em 12 gêneros e 22 espécies. Libellulidae foi a família dominante (n = 138), respondendo por 69% da fauna de odonatos. Orthetrum foi o gênero dominante (n = 73) da subordem Anisoptera, responsável por 36,5% da fauna de odonatos. Os gêneros menos dominantes foram Anax, Paragomphus e Rhyothemis (n = 5 cada), representando cada um 2,5% da fauna de odonatos. Em Zygoptera, o gênero dominante foi Ceriagrion (12,5%), e o gênero menos dominante foi Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) foi a espécie de odonato mais abundante na área de estudo, registrada em todos os habitats pesquisados. O Índice de Diversidade de Shannon (H) foi de 2,988, e o Índice de Diversidade de Simpson (D) foi de 0,95 para a fauna de odonatos coletados. A maior abundância de Odonata foi registrada em agosto, setembro e maio, enquanto nenhuma espécie de Odonata foi registrada em janeiro, fevereiro, novembro e dezembro. Corpos dágua lóticos foram os habitats mais adequados, com abundante fauna de odonatos. Anax imaculifrons (Rambur, 1842) foi a espécie de odonato de maior tamanho, com envergadura de 53,2 ± 1,63 mm e comprimento do corpo de 56,3 ± 0,4 mm. O presente estudo mostrou o status da fauna de odonatos de Swat, Paquistão, em diversos habitats e variação sazonal ao longo do ano. Recomenda-se trabalho adicional para preencher as lacunas na literatura existente.

PCR-RFLP Based genetic diversity of Plasmodium vivax genotypes in district Mardan, Pakistan / Diversidade genética baseada em PCR-RFLP de genótipos de Plasmodium vivax no distrito de Mardan, Paquistão

Plasmodium vivax is the most common human malaria parasite in Asian countries including Pakistan. Present study was designed to explore the genetic diversity of plasmodium vivax genotypes based on Pvmsp-3α and Pvmsp-3ßgenes using allelic specific nested PCR and RFLP assays markers from field isolates in district Mardan, Pakistan. Blood samples of 200 P. vivax malarial patients were collected after taking their written informed consent. Genetic diversity in nested PCR products was determined by Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) utilizing Alu1 and PstI restriction enzymes for alpha and beta gene products digestion, respectively. For analysis the genetic diversity of the sub allelic variants of Pvmsp3α and Pvmsp3ß genes, Chi-Square test was performed by utilizing Minitab programming software 18. The P value 0.05 was considered as statistically significant. For Pvmsp3α genes after gel electrophoresis of digested products, four distinct genotypes were obtained from total of 50 samples; type A: 35 (70%) (1.5-2.0 kb), 12 of type B (24%) (1.5-1.7 kb), 2 of type C (4%) (0.5-1.5) and one for type D (2%) (0.5-0.65 kb) which could be characterized into 9 allelic pattern (A1-A4, B1-B3, C1, D), in which A3 remained the most predominant. For Pvmsp-3ßgenes, three distinct genotypes were obtained from 50 samples; 40(80%) of type A (1.5-2.5 kb), 9 (18%) of type B (1.0-1.5kb) and 1(2%) of type C (0.65 kb) which could be characterized into 6 allelic patterns (A1-A3, B1-B2, and C1). Most dominant one in Type A was A1 alleles which were noted (46%), while in Type B, the most dominant were B1 (10%).This study is the first ever report of molecular epidemiology and genetic variation in Pvmsp-3α and Pvmsp-3ß genes of P. vivax isolates by using PCR/RFLP from District Mardan and showed a remarkable level of genetic diversity in the studied genes of circulating parasites in the study area. The results of this study will contribute in future studies about the genetic structure of parasite and vaccine development against the malaria.

O Plasmodium vivax é o parasita da malária humana mais comum nos países asiáticos, incluindo o Paquistão. O presente estudo foi desenhado para explorar a diversidade genética de genótipos de Plasmodium vivax baseados nos genes Pvmsp-3α e Pvmsp-3ß, usando marcadores de ensaios alélicos nested PCR e RFLP de isolados de campo no distrito de Mardan, Paquistão. Amostras de sangue de 200 pacientes com malária por P. vivax foram coletadas após assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido. A diversidade genética em produtos de PCR nested foi determinada por polimorfismo de fragmento de restrição (RFLP) utilizando as enzimas de restrição Alu1 e PstI para a digestão dos produtos dos genes alfa e beta, respectivamente. Para análise da diversidade genética das variantes subalélicas dos genes Pvmsp3α e Pvmsp3ß, o teste Qui-quadrado foi realizado utilizando o software de programação Minitab 18. O valor P = 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Para os genes Pvmsp3α, após eletroforese em gel de produtos digeridos, quatro genótipos distintos foram obtidos de um total de 50 amostras; tipo A: 35 (70%) (1,5-2,0 kb), 12 do tipo B (24%) (1,5-1,7 kb), 2 do tipo C (4%) (0,5-1,5) e um para o tipo D (2%) (0,5-0,65 kb), que podem ser caracterizados em nove padrões alélicos (A1-A4, B1-B3, C1, D), em que A3 permaneceu como o mais predominante. Para Pvmsp-3ßgenes, três genótipos distintos foram obtidos a partir de 50 amostras; 40 (80%) do tipo A (1,5-2,5 kb), 9 (18%) do tipo B (1,0-1,5 kb) e 1 (2%) do tipo C (0,65 kb), que podem ser caracterizados em seis padrões alélicos (A1-A3, B1-B2 e C1). Os mais dominantes no tipo A foram o alelo A1, observados em 46%, enquanto, no tipo B, os mais dominantes foram B1 (10%). Este estudo é o primeiro relato de epidemiologia molecular e variação genética em Pvmsp-3α. Os genes Pvmsp-3ß de isolados de P. vivax utilizando PCR/RFLP do Distrito Mardan mostraram um nível notável de diversidade genética nos genes estudados de parasitas circulantes na área de estudo. Os resultados desse estudo contribuirão em estudos futuros sobre a estrutura genética do parasita e o desenvolvimento de vacinas contra a malária.

Evaluation of sulfadimidine, amprolium and triquen to treat coccidiosis in wild pigeons / Avaliação da sulfadimidina, amprólio e triquenho no tratamento da coccidiose em pombos selvagens de Lower Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão

Coccidiosis remains one of the major problems in poultry all over the world. Very limited data on anticoccidial drugs in wild pigeons is available. The current study was aimed to understand the comparative efficacy of sulfadimidine, amprolium and triquen in wild pigeons of Dir district, Pakistan suffering from coccidiosis. The faecal matter of wild pigeons were purchased from the local market for coccidian infection. Results revealed that 88.8% (16/18) were found infected with Eimeria spp. Three positive groups were treated with sulfadimidine (0.2mg/L), amprolium (25mg/L) and triquen. Sulfadimidine was most effective (45%) followed by amprolium (44.6%) while triquen (24.0%) showed less effectiveness against coccidiosis in pigeons. Number of oocysts were 79, 81 and 80 before treatment and 60, 44 and 44 after treatment with sulfadimidine, amprolium and triquen respectively. This study showed that sulphadimidine, amprolium and triquen could not significantly reduce the coccidiosis in pigeons. Further studies are required to clear the mechanism of anti-coccidial drugs in wild pigeons.

A coccidiose continua sendo um dos maiores problemas em aves de todo o mundo. Dados muito limitados sobre drogas anticoccidiais em pombos selvagens estão disponíveis. O presente estudo teve como objetivo compreender a eficácia comparativa da sulfadimidina, amprólio e triquenho em pombos selvagens do distrito de Dir, no Paquistão, que sofrem de coccidiose. A matéria fecal dos pombos selvagens foi comprada no mercado local para infecção por coccídios. Os resultados revelaram que 88,8% (16/18) foram encontrados infectados com Eimeria spp. Três grupos positivos foram tratados com sulfadimidina (0,2mg / L), amprólio (25mg / L) e triquenho. A sulfadimidina foi mais eficaz (45%), seguida pelo amprólio (44,6%), enquanto o triquenho (24,0%) apresentou menor efetividade contra a coccidiose em pombos. O número de oocistos foram 79, 81 e 80 antes do tratamento e 60, 44 e 44 após o tratamento com sulfadimidina, amprólio e triquenho, respectivamente. Este estudo mostrou que sulphadimidine, amprolium e triquen não poderiam reduzir significativamente a coccidiose em pombos. Mais estudos são necessários para limpar o mecanismo de drogas anticoccidiais em pombos selvagens.

Evaluation of vegetables grown in dry mountainous regions for soil transmitted helminths contamination / Avaliação de vegetais para contaminação por helmintos transmitida pelo solo em quatro distritos da divisão de Malakand: noroeste do Paquistão

Infection caused by geo-helminth parasites are called geohelminthiasis are one of the global health problems. Vegetables eaten raw is the principal source of transmission of geo-helminth parasites. Pakistani people believe that eating raw vegetables are a significant source to get important vitamins and minerals. Based on the high incidence of pathogenic parasites and cultivating different vegetable types in the study areas, we conducted this study to evaluate the geo-helminth contamination of raw vegetables in northwest Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. This is a descriptive study comprised, 1942 samples of 25 various types of vegetables. The samples were examined in physiological saline solution using sedimentation and centrifugation methods. The findings were analyzed by Graph-Pad version 5. P value less than 0.05 (95% CI) was considered significant. Results showed that 16.5% (n=322) of all vegetables were contaminated with one or more type of geo-helminth parasites. Garlic was the highest (35%) and cauliflower the lowest (4%) contaminated samples respectively. Ascaris lumbricoides was the most common geohelminth found followed by hook worm species while Trichuris trichura was the least in all the vegetable samples. Leafy vegetables were highly contaminated 25.3% than vegetables with root parts 21.2% and fruity 9.09%. More than half of the contaminated vegetables were contaminated with single species of geo-helminth (P<0.05) while less than half with multiple types of geo-helminth contamination. Ninety two vegetables samples were contaminated with 2 species of parasites (P<0.05) and 45 with 3 (P>0.05) species of geo-helminth parasites. Education level of vendors and means of display were not significantly associated while types of vegetable used were significantly associated with the prevalence of parasites. The findings of this study provide evidence that consumption of raw vegetable has a high risk of acquiring geo-helminth infections. The authors believe that preventing the human to enter to the vegetable farmland for defecation, avoiding the irrigation of agricultural fields via night soil, and educating the people on proper washing and cooking of vegetables may be useful in reducing parasitic infections.

As infecções causadas por parasitas geo-helmínticos são chamados de geohelmintíases e são um dos problemas de saúde globais. Os vegetais comidos crus são a principal fonte de transmissão dos parasitas geo-helmínticos. O povo paquistanês acredita que comer vegetais crus é uma fonte significativa para obter vitaminas e minerais importantes. Com base na alta incidência de parasitas patogênicos e no cultivo de diferentes tipos de vegetais nas áreas de estudo, conduzimos este estudo para avaliar a contaminação por geo-helmintos de vegetais crus no noroeste de Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão. Trata-se de um estudo descritivo composto por 1942 amostras de 25 tipos diversos de vegetais. As amostras foram examinadas em solução salina fisiológica utilizando métodos de sedimentação e centrifugação. Os achados foram analisados pelo Graph-Pad versão 5. O valor de P menor que 0,05 (IC 95%) foi considerado significativo. Os resultados mostraram que 16,5% (n = 322) de todas as hortaliças estavam contaminadas com um ou mais tipos de parasitas geo-helmínticos. O alho foi a amostra mais contaminada (35%) e a couve-flor a menos (4%), respectivamente. Ascaris lumbricoides foi o geo-helmíntico mais comum encontrado, seguido por espécies de verme-anzol, enquanto Trichuris trichura foi o menos encontrado em todas as amostras de vegetais. Os vegetais folhosos foram altamente contaminados 25,3% do que os vegetais com partes de raiz 21,2% e frutados 9,09%. Mais da metade dos vegetais contaminados estavam contaminados com uma única espécie de geo-helmintos (P <0,05), enquanto menos da metade com vários tipos de contaminação com geo-helmintos. Noventa e duas amostras de vegetais estavam contaminadas com 2 espécies de parasitas (P <0,05) e 45 com 3 (P> 0,05) espécies de parasitas geo-helmínticos. O nível de escolaridade dos vendedores e os meios de exibição não foram significativamente associados, enquanto os tipos de vegetais usados foram significativamente associados à prevalência de parasitas. Os resultados deste estudo fornecem evidências de que o consumo de vegetais crus tem um alto risco de adquirir infecções por geo-helmintos. Os autores acreditam que impedir que o ser humano entre na terra de hortaliças para defecação, evitar a irrigação de campos agrícolas via solo noturno e educar as pessoas sobre a lavagem e cozimento adequados de vegetais pode ser útil na redução de infecções parasitárias.

Food handlers: an important reservoir of protozoans and helminth parasites of public health importance / Manipuladores de alimentos: um importante reservatório de protozoários e helmintos parasitas de importância para a saúde pública

Food handlers plays a primary role in the transmission of pathogenically important protozoans and helminth parasites. This study was aimed to evaluate the prevalence of intestinal pathogenic protozoans and helminth parasites among food handlers in and around University of Malakand, Lower Dir, Pakistan. Stool samples were collected from 642 food handlers (all of male) in a cross-sectional study from January to November, 2017. Wet Mount Techniques and concentration methods by using salt and formol­ether solutions. Three hundred and eighty four cases (59.8%) were found infected with one more parasites. Most of the individuals were found infected with helminth (47.6%) as compared to intestinal protozoans (0.93%). Seventy two cases (11.2%) of the cases presented mixed infection with both intestinal protozoan and helminth parasites. The order of prevalence for intestinal helminth was Ancylostoma duodenale (n = 258, 40.1%), followed by Taeniasa ginata (n=96, 14.9%) Ascaris lumbricoides (n = 54, 8.40%) and Trichuris trichura (n=30, 4.60%). For intestinal protozoa, Entamoeba histolytica/díspar (n = 36, 5.64%) was the only protozoan detected. Mono-parasitism was higher than poly-parasitism. Family size income and education level were the factors significantly (P<0.05) associated in the parasites prevalence. Current research showed that IPIs are primarily the foodborne pathogens still an important public health problem in Pakistan. Effective control programs on parasitic diseases transfer and their associated factors are recommended.

Os manipuladores de alimentos desempenham um papel fundamental na transmissão de protozoários e helmintos parasitas patogenicamente importantes. Este estudo teve como objetivo avaliar a prevalência de protozoários patogênicos intestinais e helmintos parasitas entre manipuladores de alimentos na Universidade de Malakand, Lower Dir, Paquistão. Amostras de fezes foram coletadas de 642 manipuladores de alimentos (todos do sexo masculino) em um estudo transversal de janeiro a novembro de 2017. Técnicas de montagem úmida e métodos de concentração usando soluções de sal e formol-éter. Trezentos e oitenta e quatro casos (59,8%) foram encontrados infectados com mais um parasita. A maioria dos indivíduos foi encontrada infectada por helmintos (47,6%) em comparação com protozoários intestinais (0,93%). Setenta e dois casos (11,2%) dos casos apresentavam infecção mista com protozoários intestinais e helmintos parasitas. A ordem de prevalência de helmintos intestinais foi Ancylostoma duodenale (n = 258, 40,1%), seguido por Taeniasa ginata (n = 96, 14,9%) Ascaris lumbricoides (n = 54, 8,40%) e Trichuris trichura (n = 30, 4,60 %). Para protozoários intestinais, Entamoeba histolytica / dispar (n = 36, 5,64%) foi o único protozoário detectado. Monoparasitismo foi maior do que poliparasitismo. A renda familiar e o nível de escolaridade foram os fatores significativamente (P <0,05) associados na prevalência de parasitos. A pesquisa atual mostrou que os IPIs são principalmente os patógenos de origem alimentar, ainda um importante problema de saúde pública no Paquistão. Programas eficazes de controle da transferência de doenças parasitárias e seus fatores associados são recomendados.

Comparative brain analysis of wild and hatchery reared Mahseer (Tor putitora) relative to their body weight and length / Análise comparativa do cérebro de Mahseer (Tor putitora) selvagem e criado em incubatório em relação ao peso e comprimento corporal

The present study was aimed at comparing the brain size of mahseer (Tor putitora) in relation to their body weight and standard length, to investigate the potential impact of rearing environment on brain development in fish. The weight of the brain and three of its subdivisions cerebellum (CB), optic tectum (OT), and telencephalon (TC) were measured for both wild and hatchery-reared fish. The data was analysed using multiple analysis of covariance (MANCOVA), analysis of covariance (ANCOVA), and discriminate function analysis (DFA). We found the fish reared under hatchery conditions exhibit smaller brain size related to body weight, when compared to the wild ones. A significant (p<0.5) difference was observed in the length of CB and OT concerning the standard body length while no significant difference was found in TC of the fish from both the origins. The results of the current study highlight a logical assumption that neural deficiency affects the behaviour of fish, that's why the captive-reared fish show maladaptive response and face fitness decline when released to the natural environment for wild stock enhancement. The current study concluded that hatchery-reared fish exhibit variations in gross brain morphology as compared to their wild counterpart.

O presente estudo teve como objetivo comparar o tamanho do cérebro de mahseer (Tor putitora) em relação ao seu peso corporal e comprimento padrão, para investigar o impacto potencial do ambiente de criação no desenvolvimento do cérebro em peixes. O peso do cérebro e três de suas subdivisões ­ cerebelo (CB), tectum óptico (OT) e telencéfalo (TC) ­ foram medidos para peixes selvagens e criados em incubadoras. Os dados foram analisados usando análise múltipla de covariância (MANCOVA), análise de covariância (ANCOVA) e análise de função discriminante (DFA). Descobrimos que os peixes criados em condições de incubação apresentam menor tamanho do cérebro em relação ao peso corporal quando comparados aos selvagens. Uma diferença significativa (p <0,5) foi observada no comprimento do CB e OT em relação ao comprimento corporal padrão, enquanto nenhuma diferença significativa foi encontrada no CT dos peixes de ambas as origens. Os resultados do estudo atual destacam uma suposição lógica de que a deficiência neural afeta o comportamento dos peixes. É por isso que os peixes criados em cativeiro mostram uma resposta mal adaptativa e enfrentam declínio de aptidão quando liberados no ambiente natural para o aprimoramento do estoque selvagem. O estudo atual concluiu que os peixes criados em incubadoras exibem variações na morfologia cerebral bruta em comparação com suas contrapartes selvagens.

Description of Lutziella swatensis sp.n. (Trematoda: Dicrocoelidae) from Rattus rattus in Swat, Pakistan / Descrição de Lutziella swatensis sp.n. (Trematoda: Dicrocoelidae) de Rattus rattus em Swat, Paquistão

A new species of the genus Lutziella (Rohde, 1966) Yamaguti, 1971 is described here and named Lutziella swatensis sp.nov. from the liver of rat (Rattus rattus L.). The new species is characterized by having body flat, smooth, longer than broad with maximum width at the level of the ovary, oral sucker with weak musculature, pharynx small; eosophagus long; caeca of irregular shape which bifurcate on the anterior border of the ovary in to unequal portions, acetabulum weakly muscular, post-testicular, testes lobed, cirrus pouch somewhat median, small in size containing winding seminal vesicle, prostatic complex and short ejaculatory duct. Genital pore median. Ovary post testicular, submedian; seminal receptacle overlapping ovary, laurer's canal present. Vitellaria follicular extending on each side from almost the level of testes to anterior portion of posterior half of the body. Uterus filled with eggs occupying most of the body, eggs oval rather small, numerous, brownish in colour, excretory vesicle tubular with terminal pore. Lutziella swatensis n. sp. is the second species of the genus known from Pakistan as well as the second species described from murid rodents in the world.

Uma nova espécie do gênero Lutziella (Rohde, 1966) Yamaguti, 1971 é descrita aqui e denominada Lutziella swatensis sp.nov. do fígado do rato (Rattus rattus L.). A nova espécie é caracterizada por ter corpo liso, liso, mais longo que largo com largura máxima ao nível do ovário, otário oral com musculatura débil, faringe pequena; eosôfago longo; ceco de forma irregular que se bifurca na borda anterior do ovário em porções desiguais, acetábulo fracamente muscular, pós-testicular, testículos lobados, bolsa cirrus um pouco mediana, pequeno em tamanho contendo vesícula seminal sinuosa, complexo prostático e ducto ejaculatório curto. Mediana dos poros genitais. Ovário pós testicular, submediano; ovário sobreposto do receptáculo seminal, canal de laurer presente. Vitellaria folicular que se estende de cada lado de quase o nível dos testículos para a porção anterior da metade posterior do corpo. Útero cheio de ovos que ocupam a maior parte do corpo, oval ovos bastante pequenos, numerosos, de cor acastanhada, vesícula excretor tubular com poro terminal. Lutziella swatensis n. sp. é a segunda espécie do gênero conhecida do Paquistão, bem como a segunda espécie descrita de roedores do mundo.

Evaluation of sulfadimidine, amprolium and triquen to treat coccidiosis in wild pigeons / Avaliação da sulfadimidina, amprólio e triquenho no tratamento da coccidiose em pombos selvagens de Lower Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão

Coccidiosis remains one of the major problems in poultry all over the world. Very limited data on anticoccidial drugs in wild pigeons is available. The current study was aimed to understand the comparative efficacy of sulfadimidine, amprolium and triquen in wild pigeons of Dir district, Pakistan suffering from coccidiosis. The faecal matter of wild pigeons were purchased from the local market for coccidian infection. Results revealed that 88.8% (16/18) were found infected with Eimeria spp. Three positive groups were treated with sulfadimidine (0.2mg/L), amprolium (25mg/L) and triquen. Sulfadimidine was most effective (45%) followed by amprolium (44.6%) while triquen (24.0%) showed less effectiveness against coccidiosis in pigeons. Number of oocysts were 79, 81 and 80 before treatment and 60, 44 and 44 after treatment with sulfadimidine, amprolium and triquen respectively. This study showed that sulphadimidine, amprolium and triquen could not significantly reduce the coccidiosis in pigeons. Further studies are required to clear the mechanism of anti-coccidial drugs in wild pigeons.

A coccidiose continua sendo um dos maiores problemas em aves de todo o mundo. Dados muito limitados sobre drogas anticoccidiais em pombos selvagens estão disponíveis. O presente estudo teve como objetivo compreender a eficácia comparativa da sulfadimidina, amprólio e triquenho em pombos selvagens do distrito de Dir, no Paquistão, que sofrem de coccidiose. A matéria fecal dos pombos selvagens foi comprada no mercado local para infecção por coccídios. Os resultados revelaram que 88,8% (16/18) foram encontrados infectados com Eimeria spp. Três grupos positivos foram tratados com sulfadimidina (0,2mg / L), amprólio (25mg / L) e triquenho. A sulfadimidina foi mais eficaz (45%), seguida pelo amprólio (44,6%), enquanto o triquenho (24,0%) apresentou menor efetividade contra a coccidiose em pombos. O número de oocistos foram 79, 81 e 80 antes do tratamento e 60, 44 e 44 após o tratamento com sulfadimidina, amprólio e triquenho, respectivamente. Este estudo mostrou que sulphadimidine, amprolium e triquen não poderiam reduzir significativamente a coccidiose em pombos. Mais estudos são necessários para limpar o mecanismo de drogas anticoccidiais em pombos selvagens.

Evaluation of vegetables grown in dry mountainous regions for soil transmitted helminths contamination / Avaliação de vegetais para contaminação por helmintos transmitida pelo solo em quatro distritos da divisão de Malakand: noroeste do Paquistão

Infection caused by geo-helminth parasites are called geohelminthiasis are one of the global health problems. Vegetables eaten raw is the principal source of transmission of geo-helminth parasites. Pakistani people believe that eating raw vegetables are a significant source to get important vitamins and minerals. Based on the high incidence of pathogenic parasites and cultivating different vegetable types in the study areas, we conducted this study to evaluate the geo-helminth contamination of raw vegetables in northwest Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. This is a descriptive study comprised, 1942 samples of 25 various types of vegetables. The samples were examined in physiological saline solution using sedimentation and centrifugation methods. The findings were analyzed by Graph-Pad version 5. P value less than 0.05 (95% CI) was considered significant. Results showed that 16.5% (n=322) of all vegetables were contaminated with one or more type of geo-helminth parasites. Garlic was the highest (35%) and cauliflower the lowest (4%) contaminated samples respectively. Ascaris lumbricoides was the most common geo helminth found followed by hook worm species while Trichuris trichura was the least in all the vegetable samples. Leafy vegetables were highly contaminated 25.3% than vegetables with root parts 21.2% and fruity 9.09%. More than half of the contaminated vegetables were contaminated with single species of geo-helminth (P0.05) species of geo-helminth parasites. Education level of vendors and means of display were not significantly associated while types of vegetable used were significantly associated with the prevalence of parasites. The findings of this study provide evidence that consumption of raw [...].

As infecções causadas por parasitas geo-helmínticos são chamados de geohelmintíases e são um dos problemas de saúde globais. Os vegetais comidos crus são a principal fonte de transmissão dos parasitas geo-helmínticos. O povo paquistanês acredita que comer vegetais crus é uma fonte significativa para obter vitaminas e minerais importantes. Com base na alta incidência de parasitas patogênicos e no cultivo de diferentes tipos de vegetais nas áreas de estudo, conduzimos este estudo para avaliar a contaminação por geo-helmintos de vegetais crus no noroeste de Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão. Trata-se de um estudo descritivo composto por 1942 amostras de 25 tipos diversos de vegetais. As amostras foram examinadas em solução salina fisiológica utilizando métodos de sedimentação e centrifugação. Os achados foram analisados pelo Graph-Pad versão 5. O valor de P menor que 0,05 (IC 95%) foi considerado significativo. Os resultados mostraram que 16,5% (n = 322) de todas as hortaliças estavam contaminadas com um ou mais tipos de parasitas geo-helmínticos. O alho foi a amostra mais contaminada (35%) e a couve-flor a menos (4%), respectivamente. Ascaris lumbricoides foi o geo-helmíntico mais comum encontrado, seguido por espécies de verme-anzol, enquanto Trichuris trichura foi o menos encontrado em todas as amostras de vegetais. Os vegetais folhosos foram altamente contaminados 25,3% do que os vegetais com partes de raiz 21,2% e frutados 9,09%. Mais da metade dos vegetais contaminados estavam contaminados com uma única espécie de geo-helmintos (P 0,05) espécies de parasitas geo-helmínticos. O nível de escolaridade dos vendedores e os meios de exibição não [...].

Description of Lutziella swatensis sp. n (Trematoda: Dicrocoelidae) from Rattus rattus in Swat, Pakistan / Descrição de Lutziella swatensis sp. n (Trematoda: Dicrocoelidae) de Rattus rattus em Swat, Paquistão

A new species of the genus Lutziella (Rohde, 1966) Yamaguti, 1971 is described here and named Lutziella swatensis sp.nov. from the liver of rat (Rattus rattus L.). The new species is characterized by having body flat, smooth, longer than broad with maximum width at the level of the ovary, oral sucker with weak musculature, pharynx small; eosophagus long; caeca of irregular shape which bifurcate on the anterior border of the ovary in to unequal portions, acetabulum weakly muscular, post-testicular, testes lobed, cirrus pouch somewhat median, small in size containing winding seminal vesicle, prostatic complex and short ejaculatory duct. Genital pore median. Ovary post testicular, submedian; seminal receptacle overlapping ovary, laurer’s canal present. Vitellaria follicular extending on each side from almost the level of testes to anterior portion of posterior half of the body. Uterus filled with eggs occupying most of the body, eggs oval rather small, numerous, brownish in colour, excretory vesicle tubular with terminal pore. Lutziella swatensis n. sp. is the second species of the genus known from Pakistan as well as the second species described from murid rodents in the world.

Uma nova espécie do gênero Lutziella (Rohde, 1966) Yamaguti, 1971 é descrita aqui e denominada Lutziella swatensis sp.nov. do fígado do rato (Rattus rattus L.). A nova espécie é caracterizada por ter corpo liso, liso, mais longo que largo com largura máxima ao nível do ovário, otário oral com musculatura débil, faringe pequena; eosôfago longo; ceco de forma irregular que se bifurca na borda anterior do ovário em porções desiguais, acetábulo fracamente muscular, pós-testicular, testículos lobados, bolsa cirrus um pouco mediana, pequeno em tamanho contendo vesícula seminal sinuosa, complexo prostático e ducto ejaculatório curto. Mediana dos poros genitais. Ovário pós testicular, submediano; ovário sobreposto do receptáculo seminal, canal de laurer presente. Vitellaria folicular que se estende de cada lado de quase o nível dos testículos para a porção anterior da metade posterior do corpo. Útero cheio de ovos que ocupam a maior parte do corpo, oval ovos bastante pequenos, numerosos, de cor acastanhada, vesícula excretor tubular com poro terminal. Lutziella swatensis n. sp. é a segunda espécie do gênero conhecida do Paquistão, bem como a segunda espécie descrita de roedores do mundo.